掃描型紫外分光光度計基于紫外-可見分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對紫外-可見光譜區(qū)(通常為190-1100nm)的輻射吸收特性進行分析。當(dāng)樣品分子吸收光能后,其內(nèi)部的電子會從低能級躍遷至高能級,產(chǎn)生特定的吸收光譜,通過測量這些光譜特性可以分析樣品的成分和結(jié)構(gòu)。下面為大家介紹掃描型紫外分光光度計的使用說明。
樣品準備:
1.溶解與稀釋:將待測樣品溶解于適當(dāng)?shù)娜軇┲?,制備成一定濃度的溶液。注意避免使用對紫外光有吸收的溶劑,以免干擾實驗結(jié)果。
2.濃度控制:樣品濃度應(yīng)適中,既保證樣品在紫外可見光區(qū)有足夠的吸光度,又避免濃度過高導(dǎo)致的吸收飽和現(xiàn)象。通常,供試品溶液的吸收度建議在0.3~0.7之間。
3.樣品清潔:使用的吸收池必須潔凈,注意配對使用。量瓶、移液管等也應(yīng)校正、洗凈后使用。取吸收池時,手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè),裝盛樣品以池體的4/5為度,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應(yīng)無溶劑殘留。
儀器配置與操作:
1.儀器檢査:開機前檢查電源是否接好,打開光度計電源和計算機電源,確保儀器處于正常工作狀態(tài)。
2.參數(shù)設(shè)置:在儀器初始化完成后,進入主用戶界面,根據(jù)需要設(shè)置掃描范圍、掃描速度和積分時間等參數(shù)。同時,選擇合適的狹縫寬度,以減少測量誤差。
3.參比溶液:通常以溶劑空白作為參比溶液,將其置于參比池中,確保液體清澈無氣泡。
4.校零與測量:將參比樣品放入比色池中,進行校零操作。然后取出參比樣品,放入待測試樣,關(guān)閉樣品室蓋,開始測量。測量過程中,注意觀察儀器狀態(tài)和數(shù)據(jù)變化,確保測量過程的穩(wěn)定性。
維護與保養(yǎng):
1.定期清潔:定期清潔分光光度計的光路和檢測器,避免使用有機溶劑或酸堿溶液,以免對儀器造成損害。使用純水或乙醇擦拭玻璃部件即可。
2.校準與檢査:定期進行校準以確保儀器的準確性。校準應(yīng)包括檢査儀器的基線漂移和波長準確性。如果發(fā)現(xiàn)問題,應(yīng)及時調(diào)整儀器或更換零件。
3.燈泡更換:定期更換分光光度計的燈泡,確保儀器的光源穩(wěn)定。更換燈泡時要遵循制造商的建議,并確保在更換燈泡之前關(guān)閉儀器電源。
4.數(shù)據(jù)存儲:定期備份分光光度計的數(shù)據(jù),確保備份數(shù)據(jù)存儲在多個位置以防止數(shù)據(jù)丟失。
5.存放環(huán)境:分光光度計應(yīng)保存在干燥的環(huán)境中,避免接觸水分或高溫。在不使用儀器時,應(yīng)將其蓋好并放置在干燥的地方。